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BACKGROUND INTRODUCTION

心肌梗死（MI）仍然是世界上，尤其是西方國家的主要死亡原因。近幾十年來，隨著預防和治療手段的快速發(fā)展，心肌梗死的發(fā)病率和死亡率顯著下降，但其仍然是世界范圍內致殘的主要原因。心肌梗死后心臟會出現多種病理改變，其中心肌纖維化在調節(jié)心功能、心力衰竭的發(fā)生發(fā)展、確定心室的大小、形狀和壁厚等方面起著重要作用。越來越多的證據表明：過度的纖維化會導致心室擴張、梗塞加劇、心力衰竭等。因此，抑制心肌纖維化具有潛在的臨床治療作用。miR－21的許多靶點都與纖維化有關，特別是與TGF－β1信號轉導途徑的調節(jié)有關，而TGF－β1信號轉導途徑已被證明在多器官纖維化的發(fā)生和發(fā)展中起著中心作用。迄今為止，文獻已報道m(xù)iR－21與肺和腎的纖維化有關嗎，但對其在心肌梗死后心肌纖維化中的作用尚不清楚。

2017年，南京中醫(yī)藥大學袁金霞等人在《Cellular Physiology and Biochemistry》（IF＝5．5； SCI生物2區(qū)）發(fā)表了題為“Mir－21 Promotes Cardiac Fibrosis After Myocardial Infarction Via Targeting Smad7”的文章。

所用到的主要方法

METHODS

1．小鼠心肌梗死模型的建立

2．細胞活力測定

3．細胞遷移試驗

4．免疫熒光染色

5．定量RT－PCR

6．蛋白質印跡法

7．微小RNA靶點預測

8．熒光素酶報告基因分析

9．超聲心動描記術

10．慢病毒表達構建與體內轉移

11．組織學分析

12．miRNA模擬／抑制劑轉染

ABSTRACT

背景／目的：心肌梗死后心肌纖維化（MI）被認為是心功能惡化的重要因素。以往的研究表明miR－21在心臟的各種病理生理過程中起著重要作用。然而，miR－21在MI后纖維化調節(jié)中的作用尚不清楚。

方法：采用小鼠冠狀動脈左前降支永久性結扎的方法誘導心肌梗死。首先，通過RT－qPCR方法研究miR－21在心肌梗死模型小鼠梗死區(qū)的表達。接下來，我們研究了TGF－β1對心肌成纖維細胞（CFs）中miR－21表達的影響。然后，用miR－21模擬物或抑制劑感染CFs，研究miR－21對體外CFs活化過程的影響。進一步，進行生物信息學分析和熒光素酶報告分析以鑒定和驗證miR－21的靶基因。最后，通過體內研究證實miR－21調節(jié)心肌梗死后心肌纖維化。

結果：MI后梗死區(qū)心肌中miR－21表達上調。TGF－β1處理可增加CFs中miR－21的表達。miR－21的過表達促進TGF－β1誘導的CFs活化，其表達增加表現為Col－1、α－SMA和F－actin的表達，而miR－21的抑制則減弱了纖維化過程。生物信息學、蛋白質印跡分析和熒光素酶報告分析證明Smad7是miR－21的直接靶點。此外，體內研究顯示miR－21調節(jié)心肌梗死后心肌纖維化。

結論：miR－21通過TGF－β／Smad7信號通路參與心肌梗死后心肌成纖維細胞（CFs）的激活和心肌纖維化。因此，miR21有望成為治療心肌梗死后心肌纖維化的治療靶點。